دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی خوزستان مجله پژوهش در متابولیت‌های گیاهی 3041-9638 4 1 2026 05 22 Identification of Secondary Metabolites in Malva sylvestris Extract Using LC/MS/MS and Its Impact on Milk Quality of Najdi Dairy Goats شناسایی متابولیت‌های ثانویه عصاره‌ گیاه پنیرک به روش LC/MS/MS و تأثیر آن بر کیفیت شیر بزهای نجدی شیرده 1 10 245874 10.22034/jrpsm.2026.553034.1097 FA حسین نوروزی گروه علوم دامی دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی خوزستان 0009-0004-8009-4322 طاهره محمدآبادی گروه علوم دامی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی خوزستان 0000-0002-8250-6704 مرتضی چاجی گروه علوم دامی، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی خوزستان Journal Article 2026 02 12 Background and Objective In recent years, the use of natural plant additives in animal nutrition has attracted attention as a safe and sustainable alternative to chemical additives. This approach is particularly important in lactating ruminants. Because milk quality depends not only on the dietary ration of the animal but also on its antioxidant status and microbial load. The mallow plant (Malva sylvestris) is native to various regions of Iran and contains various bioactive components such as phenolic compounds, flavonoids, anthocyanins, and alkaloids. These compounds have antioxidant, anti-inflammatory and antimicrobial properties and can play an effective role in improving the animal health and quality of animal products. There is limited information about the nutritional application of mallow extract on milk quality. Therefore, the objective of this study was to identify the secondary metabolites of the ethanolic extract of the mallow plant using the LC/MS/MS method and to investigate the effect of adding this extract to the diet of lactating Najdi goats on milk antioxidant capacity and microbial load. Materials and Methods The mallow plant was collected at the flowering stage. After drying the samples in the shade, extraction was performed using the maceration method with 70% ethanol at a ratio of 1:10 (weight/volume) for 24 hours at room temperature. Following filtration, the solvent was removed using a rotary evaporator, and the final extract was stored at 4 °C until further analysis. Identification of the bioactive compounds of the extract was carried out using an LC–MS/MS system (Waters, USA). For separation of the compounds, a C18 column and a mobile phase consisting of 1% formic acid in water and acetonitrile were used. The obtained data were analyzed using MassLynx software. In the animal section of the experiment, twelve lactating Najdi goats with an average body weight of 26 ± 4 kg were divided into three treatments in a completely randomized design: control group: basal diet (without extract addition), treatment one: basal diet + extract at 0.2% of daily dry matter intake, and treatment two: basal diet + extract at 0.4% of daily dry matter intake. Milk antioxidant capacity was measured using the DPPH assay, and milk microbial load was measured using the culture method on Plate Count Agar medium and colony counting. Results The results obtained from LC/MS/MS analysis showed that the ethanolic extract of the mallow plant contained 11 phenolic compounds, 4 anthocyanins, and 7 alkaloids. The identified phenolic compounds included gallic acid, benzoic acid, syringic acid, 3,4‑dimethoxycinnamic acid, p-coumaric acid, myristicin, caffeic acid, luteolin, chlorogenic acid, and apigenin. The highest concentrations were for p-coumaric acid and 3,4‑dimethoxycinnamic acid. The identified anthocyanins included malvidin‑3‑O‑glucoside, cyanidin‑3‑glucoside, delphinidin‑3‑O‑glucoside, and cyanidin‑3‑rutinoside. In addition, alkaloids such as tetrandrine and cocsuline were identified which have been reported in previous studies to exhibit antimicrobial and anti‑inflammatory properties. Supplementation of mallow extract in the diet of lactating goats caused a significant increase in milk antioxidant capacity compared with the control group, such that the highest value was observed in the treatment receiving 0.4% extract. Moreover, the milk microbial load in the treatments containing mallow extract was significantly reduced. Conclusion Based on the results of this study, the ethanolic extract of the mallow plant is rich in phenolic, anthocyanin, and alkaloid compounds with antioxidant and antimicrobial properties. Adding this extract to the diet of lactating Najdi goats improved milk antioxidant capacity and reduced milk microbial load. Therefore, mallow extract may be used as an effective natural additive in the nutrition of lactating goats in order to improve the nutritional and hygienic quality of milk. سابقه و هدف: در سال‌های اخیر، استفاده از افزودنی‌های طبیعی و گیاهی در تغذیه دام به‌عنوان جایگزینی ایمن و پایدار برای افزودنی‌های شیمیایی مورد توجه قرار گرفته است. این رویکرد به‌ویژه در نشخوارکنندگان شیرده از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است، زیرا کیفیت شیر علاوه بر ترکیب جیره غذایی، به وضعیت آنتی‌اکسیدانی و بار میکروبی آن نیز وابسته است. گیاه پنیرک (Malva sylvestris) بومی مناطق مختلف ایران است که حاوی ترکیبات زیست‌فعال متعددی از جمله ترکیبات فنولی، فلاونوئیدها، آنتوسیانین‌ها و آلکالوئیدها می‌باشد. این ترکیبات دارای خواص آنتی‌اکسیدانی، ضدالتهابی و ضد‌میکروبی بوده و می‌توانند نقش مؤثری در بهبود سلامت دام و کیفیت فرآورده‌های دامی ایفا کنند. اطلاعات محدودی درباره کاربرد تغذیه‌ای عصاره پنیرک بر کیفیت شیر وجود دارد. بنابراین، هدف از این پژوهش شناسایی متابولیت‌های ثانویه عصاره اتانولی گیاه پنیرک با استفاده از روش LC/MS/MS و بررسی اثر افزودن این عصاره به جیره بزهای نجدی شیرده بر ظرفیت آنتی‌اکسیدانی و بار میکروبی شیر بود. مواد و روش‌ها: گیاه پنیرک در مرحله گل‌دهی جمع‌آوری شد. پس از خشک‌کردن نمونه‌ها در سایه، عصاره‌گیری به روش خیساندن (Maceration) با استفاده از اتانول ۷۰ درصد و نسبت ۱۰:۱ (وزن/حجم) به مدت ۲۴ ساعت در دمای اتاق انجام گرفت. پس از صاف‌سازی، حلال با استفاده از دستگاه روتاری اواپراتور تبخیر شد و عصاره نهایی در دمای ۴ درجه سانتی‌گراد برای آنالیز بعدی نگهداری گردید. شناسایی ترکیبات زیست‌فعال عصاره با استفاده از دستگاه LC/MS/MS (Waters، آمریکا) انجام شد. برای جداسازی ترکیبات، از ستون C18 و فاز متحرک شامل اسید فرمیک ۱ درصد در آب و استونیتریل استفاده گردید. داده‌ها با نرم‌افزار MassLynx تحلیل شدند. در بخش دامی آزمایش، ۱۲ رأس بز نجدی شیرده با میانگین وزن ۴ ± ۲۶ کیلوگرم در قالب طرح کاملاً تصادفی به سه تیمار تقسیم شدند: گروه کنترل: جیره پایه (بدون افزودن عصاره)، تیمار یک: جیره پایه + عصاره به میزان 2/0 درصد ماده خشک مصرفی روزانه و تیمار دو: جیره پایه + 4/0 درصد ماده خشک مصرفی روزانه. ظرفیت آنتی‌اکسیدانی شیر با آزمون DPPH و بار میکروبی شیر با روش کشت در محیط Plate Count Agar و شمارش کلنی‌ها اندازه‌گیری شد. نتایج: نتایج حاصل از آنالیز LC/MS/MS نشان داد که عصاره اتانولی گیاه پنیرک حاوی ۱۱ ترکیب فنولی، ۴ آنتوسیانین و ۷ آلکالوئید است. ترکیبات فنولی شناسایی‌شده شامل اسید گالیک، اسید بنزوئیک، اسید سیرینجیک، اسید ۳،۴‑دی‌متوکسی‌سینامیک، اسید p-کوماریک، میریستیسین، اسید کافئیک، لوتئولین، اسید کلروژنیک و آپیژنین بودند. بیشترین غلظت مربوط به اسید p-کوماریک و اسید ۳،۴‑دی‌متوکسی‌سینامیک بود. آنتوسیانین‌های شناسایی‌شده شامل مالویدین‑۳‑O-گلوکوزید، سیانیدین‑۳‑گلوکوزید، دلفینیدین‑۳‑O-گلوکوزید و سیانیدین‑۳‑روتینوزید بودند. همچنین، آلکالوئیدهایی نظیر تتراندرین و کوکسولین شناسایی شدند که طبق مطالعات پیشین دارای اثرات ضد‌میکروبی و ضد‌التهابی هستند. افزودن عصاره پنیرک به جیره بزهای شیرده موجب افزایش معنی‌دار ظرفیت آنتی‌اکسیدانی شیر نسبت به گروه کنترل شد، به‌طوری‌که بیشترین مقدار در تیمار دریافت‌کننده 4/0 درصد عصاره مشاهده گردید. همچنین، بار میکروبی شیر در تیمارهای حاوی عصاره پنیرک به‌طور معنی‌داری کاهش یافت. نتیجه‌گیری: بر اساس نتایج این مطالعه، عصاره اتانولی گیاه پنیرک غنی از ترکیبات فنولی، آنتوسیانینی و آلکالوئیدی با خواص آنتی‌اکسیدانی و ضد‌میکروبی است. افزودن این عصاره به جیره بزهای نجدی شیرده موجب بهبود ظرفیت آنتی‌اکسیدانی و کاهش بار میکروبی شیر شد. بنابراین، عصاره پنیرک شاید بتواند به‌عنوان یک افزودنی طبیعی مؤثر در تغذیه بزهای شیرده به‌منظور ارتقای کیفیت تغذیه‌ای و بهداشتی شیر مورد استفاده قرار گیرد.

https://jrpsm.asnrukh.ac.ir/article_245874_8721e32f7be426fb9fd2e347dbec4018.pdf